Introducción: Infección del Tracto Urinario (ITU) se define como la presencia o multiplicación de microorganismos en el sistema urinario, que abarca desde la bacteriuria asintomática hasta la pielonefritis aguda con septicemia, constituyendo una de las patologías clínicas que más prevalece en la población. Objetivo: Determinar los agentes etiológicos de infecciones urinarias y su resistencia antimicrobiana en pacientes ambulatorios y hospitalizados en el CIMEQ durante el período 2008-2010. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio del 2008-2010 a partir de muestras de orina procedente de pacientes hospitalizados y ambulatorios con sospecha de ITU, estas fueron procesadas en el Laboratorio de Microbiología del hospital CIMEQ por el sistema semiautomático Diramic 6.0. La identificación de los microorganismos se efectuó siguiendo manual del Bergey’s (2001). La evaluación de la resistencia antimicrobiana se realizó por el sistema Diramic 6.0.  Resultados: Resultaron negativos el 69,2% de los urocultivos, positivos el 25,6% y el 5,3% muestras polimicrobianas. Escherichia coli fue el microorganismo aislado con mayor frecuencia en pacientes ambulatorios y hospitalizados. Las cepas de E. coli aisladas en pacientes ambulatorios presentaron mayor resistencia frente a ácido nalidíxico, sulfaprim y norfloxacino, el 20,9% presentaron cuatro patrones de resistencia, siendo los más frecuentes los de resistencia simultánea a uno y tres antimicrobianos. Las cepas de E. coli aisladas en pacientes hospitalizados presentaron mayor resistencia frente a ciprofloxacino, el 33,4% presentaron resistencia a más de un antimicrobiano, con 21 patrones de resistencia diferentes, siendo los más frecuentes los de resistencia simultánea a uno, cinco y seis.